分(fen)光(guang)(guang)光(guang)(guang)度(du)計是用不(bu)連續(xu)的(de)波長采樣反(fan)射(she)物(wu)(wu)體(ti)(ti)或(huo)透(tou)射(she)物(wu)(wu)體(ti)(ti)的(de)一種(zhong)測量儀器。由于不(bu)同(tong)(tong)物(wu)(wu)體(ti)(ti)分(fen)子的(de)結構不(bu)同(tong)(tong)，對不(bu)同(tong)(tong)波長光(guang)(guang)線的(de)吸收能力也不(bu)同(tong)(tong)，因(yin)此，每種(zhong)物(wu)(wu)體(ti)(ti)都具有(you)特定的(de)吸收光(guang)(guang)譜。能從含有(you)各(ge)種(zhong)波長的(de)混合光(guang)(guang)中，將每一種(zhong)單色(se)光(guang)(guang)分(fen)離出來，并測量其強度(du)的(de)儀器叫做(zuo)分(fen)光(guang)(guang)光(guang)(guang)度(du)計。
分(fen)(fen)光(guang)(guang)光(guang)(guang)度(du)法是比色法的(de)發展。比色法只限于在可見光(guang)(guang)區，分(fen)(fen)光(guang)(guang)光(guang)(guang)度(du)法則(ze)可以(yi)擴展到紫(zi)外(wai)光(guang)(guang)區和紅外(wai)光(guang)(guang)區。分(fen)(fen)光(guang)(guang)光(guang)(guang)度(du)法則(ze)要(yao)求近于真正單(dan)色光(guang)(guang)，其光(guang)(guang)譜帶寬最大不超過(guo)3－5nm，在紫(zi)外(wai)區可到1nm以(yi)下，來自棱鏡或光(guang)(guang)柵，具有較高(gao)的(de)精(jing)度(du)。
分光光度計可分為紫外分光(guang)光(guang)度計、可見光分光光度計（或比色計）、紅外分光光度計或原子吸收分光光度計。
歐萊(lai)博可見分(fen)光光度計
項目對分(fen)析結(jie)果的影響
1、波長準確(que)度(du)
分(fen)光(guang)(guang)(guang)光(guang)(guang)(guang)度(du)法原(yuan)理要求(qiu)(qiu)照射在樣品(pin)池(chi)上的(de)單(dan)(dan)色(se)光(guang)(guang)(guang)必(bi)須(xu)對(dui)應于(yu)樣品(pin)吸(xi)(xi)收(shou)(shou)光(guang)(guang)(guang)譜中(zhong)的(de)某一個吸(xi)(xi)收(shou)(shou)峰(feng)的(de)波(bo)長。由于(yu)儀器(qi)(qi)的(de)制造和調整誤差(cha)，單(dan)(dan)色(se)光(guang)(guang)(guang)的(de)實際波(bo)長與儀器(qi)(qi)的(de)波(bo)長讀數值(zhi)間(jian)都存在一定的(de)誤差(cha)。樣品(pin)中(zhong)絕大部(bu)分(fen)的(de)主要吸(xi)(xi)收(shou)(shou)峰(feng)都有一定的(de)寬(kuan)(kuan)度(du)，對(dui)波(bo)長準(zhun)確(que)度(du)要求(qiu)(qiu)允許寬(kuan)(kuan)些。但是，當吸(xi)(xi)收(shou)(shou)峰(feng)寬(kuan)(kuan)度(du)較(jiao)(jiao)小，而且(qie)吸(xi)(xi)收(shou)(shou)峰(feng)兩側邊緣比較(jiao)(jiao)陡直(zhi)，此時(shi)波(bo)長準(zhun)確(que)度(du)的(de)影響(xiang)就必(bi)須(xu)引起注意。
2、透射比(bi)（吸光度）準確(que)度
很顯(xian)然,透射比(bi)或(huo)吸光(guang)度(du)的(de)誤(wu)差越大,測試結(jie)果的(de)可(ke)信性越差,從而影響到測試數據(ju)的(de)準確性。
3、雜散(san)光(guang)
雜散(san)光(guang)(guang)是(shi)由于(yu)光(guang)(guang)學元件(jian)制造誤(wu)差以(yi)及光(guang)(guang)學和機械零件(jian)表面的(de)(de)漫(man)反(fan)射形成的(de)(de)。雜散(san)光(guang)(guang)是(shi)分(fen)析(xi)樣(yang)(yang)品的(de)(de)非吸收光(guang)(guang)，隨著樣(yang)(yang)品濃度的(de)(de)增加，雜散(san)光(guang)(guang)的(de)(de)影(ying)響(xiang)也隨之增大(da)，將(jiang)給分(fen)析(xi)結果帶來一定的(de)(de)誤(wu)差。在紫外的(de)(de)短波區(qu)域光(guang)(guang)源強度和檢測器的(de)(de)靈敏度均明顯減弱，雜散(san)光(guang)(guang)的(de)(de)影(ying)響(xiang)更不(bu)能忽視。因此，雜散(san)光(guang)(guang)的(de)(de)大(da)小也是(shi)儀器性能的(de)(de)一項(xiang)重要指(zhi)標。
使(shi)用與維護
1、若大幅度改變(bian)測試波長(chang)，需稍等片刻，等燈熱平(ping)衡后，重(zhong)新(xin)校正“0”和“100%”點。然后再測量。
2、指(zhi)針(zhen)式儀器在未接通電源時，電表的(de)指(zhi)針(zhen)必須位于零(ling)刻度(du)上。若不是這(zhe)種情況(kuang)，需進行機械(xie)調零(ling)。
3、比色(se)皿使用完畢后，請立即(ji)用蒸餾水沖洗(xi)干凈，并用干凈柔(rou)軟的紗布(bu)將(jiang)水跡擦去(qu)，以防止表面(mian)光(guang)潔度被破壞，影響比色(se)皿的透光(guang)率。
4、操作人員不應輕易(yi)動燈泡(pao)及反光鏡(jing)燈，以免影(ying)響光效(xiao)率。
5、WFZ800-DA、756型等分(fen)光(guang)(guang)(guang)(guang)光(guang)(guang)(guang)(guang)度計，由于其(qi)(qi)光(guang)(guang)(guang)(guang)電接收裝置為光(guang)(guang)(guang)(guang)電倍增管(guan)，它本身的特點是放大(da)倍數大(da)，因(yin)而可以用(yong)(yong)于檢(jian)測微弱光(guang)(guang)(guang)(guang)電信號(hao)，而不(bu)能用(yong)(yong)來檢(jian)測強(qiang)光(guang)(guang)(guang)(guang)。否則容易產生信號(hao)漂(piao)移(yi)，靈敏(min)度下降。針對(dui)其(qi)(qi)上述特點，在維修、使用(yong)(yong)此類儀器時(shi)(shi)應注(zhu)意不(bu)讓光(guang)(guang)(guang)(guang)電倍增管(guan)長(chang)(chang)時(shi)(shi)間暴(bao)露于光(guang)(guang)(guang)(guang)下，因(yin)此在預(yu)熱時(shi)(shi)，應打開比色皿蓋(gai)或(huo)使用(yong)(yong)擋光(guang)(guang)(guang)(guang)桿(gan)，避(bi)免長(chang)(chang)時(shi)(shi)間照射使其(qi)(qi)性能漂(piao)移(yi)而導致工(gong)作不(bu)穩。
6、放大器靈敏度換(huan)擋后，必須(xu)重新調零。
7、比色杯的配(pei)套性問題。比色杯必須配(pei)套使用，否則將使測試結果(guo)失去(qu)意(yi)義(yi)。在進行每次測試前均應進行比較(jiao)。
具體方法(fa)如(ru)下：分別向被測的(de)兩只杯(bei)子里注(zhu)入同(tong)樣的(de)溶(rong)液(ye)，把(ba)儀(yi)器置于某一波長處，石英(ying)比色杯(bei)；220nm、700nm裝蒸餾水(shui)，玻璃比色杯(bei)：700nm處裝蒸餾水(shui)，將某一個池(chi)的(de)透(tou)射(she)比值調至100%，測量其(qi)(qi)他各池(chi)的(de)透(tou)射(she)比值，記錄其(qi)(qi)示值之(zhi)差及通光方向，如(ru)透(tou)射(she)比之(zhi)差在±0.5%的(de)范圍內則(ze)可以配(pei)套(tao)使(shi)用，若(ruo)超(chao)出此(ci)范圍應考(kao)慮其(qi)(qi)對(dui)測試結果的(de)影響。
典型故障及其排(pai)除方法
1、儀器不能調(diao)零。可能原(yuan)因：
a.光(guang)門(men)不(bu)能完全關閉(bi)。解決方(fang)法(fa)：修復(fu)光(guang)門(men)部(bu)件，使其(qi)完全關閉(bi)。
b.透(tou)過(guo)率“100%”旋到(dao)底了。解(jie)決(jue)方法(fa)：重新調整“100%”旋鈕。
c.儀器嚴重受潮。解決方法：可(ke)打開(kai)光電管暗盒，用電吹風(feng)吹上一會兒(er)使其干(gan)(gan)燥(zao)，并更換干(gan)(gan)燥(zao)劑。
d.電(dian)(dian)路故(gu)障。解(jie)決方法：檢修電(dian)(dian)路。
2、儀器不能(neng)調“100%”，可能(neng)原因：
a.光能量不夠(gou)。解決(jue)方(fang)法(fa)：增(zeng)加靈(ling)敏度倍率檔(dang)位，或更換光源燈（盡管燈還(huan)亮）。
b.比(bi)色(se)皿架未落位。解決方法：調整比(bi)色(se)皿架使其落位。
c.光電轉換(huan)部分(fen)老化。解決方法(fa)：更換(huan)部件(jian)。
d.電路(lu)故(gu)障。解決(jue)方法：調修電路(lu)。
3、測(ce)量過程中,“100%”點經常(chang)變動。可能(neng)原因：
a.比(bi)(bi)(bi)色皿(min)在比(bi)(bi)(bi)色皿(min)架中放置的位(wei)置不(bu)一致(zhi)，或(huo)其表面(mian)(mian)有液滴。解(jie)決方法：用擦(ca)(ca)鏡紙擦(ca)(ca)干凈比(bi)(bi)(bi)色皿(min)表面(mian)(mian)，然后將其安放在比(bi)(bi)(bi)色槽(cao)的左邊，上(shang)面(mian)(mian)用定位(wei)夾定位(wei)。
b.電路故障（電壓(ya)、光電接收、放(fang)大電路）。解決方法：送(song)修。
4、數(shu)顯(xian)不穩。可(ke)能原(yuan)因：
a.預(yu)熱時間不夠。解決方(fang)法：延長預(yu)熱時間至(zhi)30分(fen)鐘左右(you)（部分(fen)儀器由于老(lao)化等原(yuan)因，長時間處(chu)于工作狀(zhuang)態(tai)時，也會工作不穩(wen)）。
b.光(guang)電(dian)管內的干(gan)燥劑(ji)失效(xiao)，使微電(dian)流放(fang)大(da)器受潮。解決方法：烘(hong)烤電(dian)路，并更(geng)換或(huo)烘(hong)烤干(gan)燥劑(ji)。
c.環境振動過大(da)(da)、光源附近(jin)空氣流速大(da)(da)、外(wai)界(jie)強光照射等(deng)。解決方法(fa)：改善工作環境。
d.光(guang)電管、電路等其它原因。
綜上所述，以下幾個問題應引起儀(yi)器操作人員注(zhu)意(yi)：
1、比(bi)(bi)色皿(min)架(jia)及比(bi)(bi)色皿(min)在使(shi)用(yong)中的正確(que)到(dao)位問題：有些使(shi)用(yong)者對這(zhe)個問題不夠(gou)重視(shi)，因操作不當造(zao)成偶(ou)然誤差，嚴重影(ying)響(xiang)分析結果。首先，應保(bao)(bao)證(zheng)比(bi)(bi)色皿(min)不傾(qing)斜放置。稍許傾(qing)斜，就會使(shi)參比(bi)(bi)樣品與(yu)待(dai)測(ce)(ce)樣品的吸收(shou)光徑(jing)長(chang)度不一致(zhi)，還可(ke)能使(shi)入射光不能全部通過(guo)樣品池，導致(zhi)測(ce)(ce)試比(bi)(bi)準確(que)度不符(fu)合要(yao)求。其次，應保(bao)(bao)證(zheng)每次測(ce)(ce)試時，比(bi)(bi)色皿(min)架(jia)推(tui)拉到(dao)位。若不到(dao)位，將影(ying)響(xiang)到(dao)測(ce)(ce)試值的重復性或準確(que)度。最(zui)后,還應保(bao)(bao)證(zheng)比(bi)(bi)色皿(min)的清潔度,延長(chang)其使(shi)用(yong)壽(shou)命。
2、干燥劑(ji)的使用問題。干燥劑(ji)失效(xiao)將導致(zhi)：a.數顯不穩、無法調“0”點(dian)或(huo)“100%”點(dian)（電路或(huo)光(guang)(guang)(guang)電管受潮）。b.反射鏡發霉或(huo)沾污(wu)，影響光(guang)(guang)(guang)效(xiao)率(lv)、雜散光(guang)(guang)(guang)增(zeng)加。鑒于上述原因，分光(guang)(guang)(guang)光(guang)(guang)(guang)度計的放置(zhi)地點(dian)應(ying)遠離水池等(deng)濕度大的地方(fang)、干燥劑(ji)應(ying)定期更(geng)換或(huo)烘烤(kao)。
3、儀器的工作環(huan)境(jing)：應(ying)避(bi)免(mian)陽光直射、避(bi)免(mian)強電場、避(bi)免(mian)與較(jiao)大功率的電器設(she)備共(gong)電、避(bi)開腐蝕性(xing)氣體等。
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